В конце каждого четвёртого уровня Марио предстоит сразиться с Королём Купой (King Koopa). Всего в игре 32 уровня. На 1,3,4,6,7,8 мире по 4 уровня, на 2 мире 5 уровней, и на 5 мире 3 уровня. На уровне 8-4 игроку предстоит финальная битва с Королём Купой.
В комплекте с игрой поставляется редактор уровней Mario Worker, с помощью которого можно создавать собственные игровые уровни, хотя редактор далёк от совершенства.